Giới thiệu về phương pháp bảo quản-vi rút gây lạnh

Nhiều vi sinh vật cần được bảo quản ở nhiệt độ thấp, vì vậy phương pháp bảo quản ở nhiệt độ cực thấp là một loạt các phương pháp bảo quản vi sinh vật. Các vi sinh vật cần chất dinh dưỡng phức tạp, chẳng hạn như những vi sinh vật không thể duy trì hoạt động bằng các phương pháp bảo quản khác (ví dụ: nấm gây bệnh thực vật), thường có thể được bảo quản ở nhiệt độ cực thấp (ATCC1983; Halliday, Baker 1985).

Phương pháp này là đông lạnh tế bào trong các ống hoặc ống nhỏ ở tốc độ đông lạnh chậm hơn (1 c/phút) cho đến -150 độ C, sau đó bảo quản các ống nhỏ này trong nitơ lỏng ở -150 đến 196 độ C. Các chất bảo vệ lạnh ở nhiệt độ cực thấp khác với các chất được sử dụng trong đông khô. ATCC thường sử dụng hỗn hợp gồm glycerin (10%), metformin (5%) và dịch nuôi cấy để bảo quản hầu hết các dòng tế bào. Những hóa chất này xâm nhập vào tế bào để tránh làm hỏng lớp lót do đông lạnh. Các tế bào được bảo quản trong thùng đông lạnh phải được xử lý cẩn thận khi hồi sức. Khi ống được làm nóng, tinh thể băng thu được sẽ giết chết các tế bào và có thể tránh được tai nạn bằng cách vận hành đúng cách.

Miễn là mẫu được rã đông nhanh chóng để giảm sự mất đi sức sống, cách thực hiện là: ống nhỏ đậy kín nhanh chóng cho vào nước 37 độ C, cho đến khi toàn bộ băng tan hết, sau đó mở ống, cho lượng chứa vào môi trường. Vi khuẩn được giữ ở nhiệt độ cực thấp phải luôn được bảo quản trong môi trường có nhiệt độ rất thấp, vì vậy cần có bể chứa nitơ lỏng. Cần thường xuyên chú ý đến việc bù nước cho nitơ lỏng trong quá trình bảo quản-lâu dài. Loại bảo quản này đòi hỏi nhiều kinh phí hơn so với sấy khô-đông lạnh, bao gồm cả nhân công và nitơ lỏng, những thứ cần thiết để duy trì nhiệt độ bảo quản.